荧光滤波片选取的原则是在成像端尽可能让荧光/发射光透过,同时完全阻挡激发光,获得最高的信噪比。尤其是对于多光子激发和全内反射显微镜的应用,微弱的噪声也会对成像效果造成很大的干扰,因此对信噪比的要求更高。
通常我们看滤光片的参数一般会看透射率光谱,但往往荧光相对于激发光的强度很弱,选择滤光片更需要参考阻挡深度光谱图——OD值。OD值更能直观地反映滤光片对光的阻挡特性。
在选择激发滤光片和发射滤光片时,两者的阻挡深度光谱交点(OD交点)是重要的判断标准,一般要求宽场光源激发是交点OD值大于5,激光激发时大于OD6,以实现较好的荧光信噪比。