在荧光显微镜领域,激发滤光片、二向色镜以及发射滤光片一般集成于同一立方体内,其设计初衷是适配特定的荧光团或荧光蛋白光谱。不过,在某些特殊情形下,滤光片也可能脱离立方体,转而安装在被称为滤光片转盘的转轮之上。
借助滤光片转盘,使用者能够灵活地进行混合搭配,以精准匹配所需的激发与发射波长。其核心目的在于精准捕获结合靶标的荧光基团所发出的光信号,同时有效屏蔽系统内其他无关光线,如环境光以及激发光源产生的光线等。
那么,荧光成像所运用的滤光片究竟包含哪些类型呢?
通常而言,滤光片组的设计旨在捕捉特定荧光团的最大激发与发射波长,但并非能够捕获全部荧光。大多数现代滤光片组的设计理念是保障激发滤光片仅允许特定波长区间的光线顺利通过,这类滤光片即为带通滤光片。
带通滤光片一般依据中间波长和区间宽度予以确定。在较为简易的荧光显微镜装置中,激发光线一旦穿越激发滤光片,便会径直照射到靶标之上,靶标上的荧光基团旋即进入激发态,随后发射出向光谱红外端(相较于激发光线)迁移的光线。但并非所有此类发射光线都能被检测器所捕捉,唯有那些能够顺利穿过二向色镜且符合发射滤光片要求的光线才能被成功检测。
发射滤光片通常可分为带通滤光片或者长波通滤光片,具体的选择取决于特定的荧光团以及成像实验的要求。倘若使用者期望让超过特定波长的光线抵达检测器,那么长波通滤光片无疑是合适之选。
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